Effects of disturbed blood flow during exercise on endothelial function: a time course analysis

This study aimed to examine the time course of endothelial function after a single handgrip exercise session combined with blood flow restriction in healthy young men. Nine participants (28±5.8 years) completed a single session of bilateral dynamic handgrip exercise (20 min with 60% of the maximum voluntary contraction). To induce blood flow restriction, a cuff was placed 2 cm below the antecubital fossa in the experimental arm. This cuff was inflated to 80 mmHg before initiation of exercise and maintained through the duration of the protocol. The experimental arm and control arm were randomly selected for all subjects. Brachial artery flow-mediated dilation (FMD) and blood flow velocity profiles were assessed using Doppler ultrasonography before initiation of the exercise, and at 15 and 60 min after its cessation. Blood flow velocity profiles were also assessed during exercise. There was a significant increase in FMD 15 min after exercise in the control arm compared with before exercise (64.09%±16.59%, P=0.001), but there was no change in the experimental arm (-12.48%±12.64%, P=0.252). FMD values at 15 min post-exercise were significantly higher for the control arm in comparison to the experimental arm (P=0.004). FMD returned to near baseline values at 60 min after exercise, with no significant difference between arms (P=0.424). A single handgrip exercise bout provoked an acute increase in FMD 15 min after exercise, returning to near baseline values at 60 min. This response was blunted by the addition of an inflated pneumatic cuff to the exercising arm.

Identification of sarcopenic obesity in postmenopausal women: a cutoff proposal

Sarcopenic obesity is the combination of reduced fat-free mass (FFM) and increased fat mass (FM) with advancing age but there is lack of clear criteria for its identification. The purposes of the present investigation were: 1) to determine the prevalence of postmenopausal women with reduced FFM relative to their FM and height, and 2) to examine whether there are associations between the proposed classification and health-related variables. A total of 607 women were included in this cross-sectional study and were separated into two subsets: 258 older women with a mean age of 66.8 ± 5.6 years and 349 young women aged 18-40 years (mean age, 29.0 ± 7.5 years). All volunteers underwent body composition assessment by dual-energy X-ray absorptiometry. The FFM index relative to FM and height was calculated and the cutoff value corresponded to two standard deviations below the mean of the young reference group. To examine the clinical significance of the classification, all older participants underwent measurements of quadriceps strength and cardiorespiratory fitness. Values were compared between those who were classified as low FFM or not, using an independent samples t-test and correlations were examined. The cutoff corresponded to a residual of -3.4 and generated a sarcopenic obesity prevalence of 19.8 percent that was associated with reduced muscle strength and aerobic fitness among the older participants. Also, the index correlated significantly with the health-related fitness variables. The results demonstrated reduced functional capacity for those below the proposed cutoff and suggested applicability of the approach as a definition for sarcopenic obesity.

A multiplex single-base extension protocol for genotyping Cdx2, FokI, BsmI, ApaI, and TaqI polymorphisms of the vitamin D receptor gene

The well-described role of the vitamin D endocrine system in bone metabolism makes its receptor a widely investigated candidate gene in association studies looking for the genetic basis of complex bone-related phenotypes. Most association studies genotype five polymorphic sites along the gene using PCR-RFLP and allele-specific amplification methods, which may not be the better choice in large case/control or cross-sectional studies. In this case, genotyping SNPs in parallel and using automated allele-calling methods are important to decrease genotyping errors due to manual data handling and save sample in cases where the amount of DNA is limited. The aim of this study was to present a straightforward method based on multiplex PCR amplification followed by multiplex single-base extension as a simple way to genotype five vitamin D receptor gene polymorphisms in parallel, which may be implemented in medium- to large-scale case/control or cross-sectional studies. The results regarding method feasibility and optimization are presented by genotyping eight paternity trios and seven samples of Brazilian postmenopausal women who took part in an ongoing association study carried out by members of our group.

Análise de polimorfismos do gene da ß-lactoglobulina em vacas da raça Nelore e efeitos sobre o peso à desmama de suas progênies / Polimorphism analisys of ß-lactoglobulin gene on Nellore cows and effects on weaning weight of the calves

Informaçöes sobre peso à desmama de bezerros Nelore foram utilizadas após ajuste para idade padräo aos 205 dias, sexo, idade da mäe, touro e mês de desmama, para separar as reprodutrizes em dois grupos, segundo o peso de suas crias. As médias de peso dos bezerros ajustadas pelo método dos quadrados mínimos e erros-padräo (LSMñSE) foram para os grupos pesados (P) e leves (L) 163,21ñ2,18kg e 134,44ñ2,18kg, respectivamente, com 41 animais em cada grupo. Essas reprodutrizes foram submetidas a coleta de sangue para estudo de polimorfismos do gene da ß-lactoglobulina, por meio da técnica de PCR-RFLP. A amplificaçäo e a digestäo de um fragmento do gene da ß-lactoglobulina entre o éxon II e III identificou os genótipos 1AA, 24AB e 56BB, com as freqüências de 0,16 e 0,84 para os alelos. A e B, respectivamente. Os 24 animais com genótipo AB apresentaram LSMñSE de peso de seus produtos de 149,50ñ4,17kg, e os 56 animais de genótipo BB tiveram média de 148,44ñ2,73kg. O teste do quiquadrado näo apresentou significância (P>0,05), isto é, os grupos P e L näo diferiram entre si quanto às freqüências alélicas apresentadas para esse gene. O genótipo das reprodutrizes näo afetou o peso à desmama de suas crias, o que sugere haver outros fatores genéticos e näo genéticos de maior magnitude que afetam o peso à desmama

Análise de polimorfismos do gene da beta-lactoglobulina em vacas da raça Nelore e efeitos sobre o peso à desmama de suas progênies

Weaning weights from a Nelore herd were used after adjustment of means for 205 days of age, sex, age of dam, sire and weaning month, and resulted into two groups of cows that differed by the weaning weight of their calves. The least square means (LSM) and standard error (SE) were for heavy group 163.21± 2.18kg and for light group 134.44± 2.18kg, with 41 animals in each group. These animals were genotyped by DNA polymorphisms of beta -lactoglobulin gene, using PCR-RFLP. After amplification and digestion of a beta-lactoglobulin gene fragment between II and III exon, genotypes 1AA, 24AB and 56BB were identified, with 0.16 and 0.84 frequencies for A and B alleles, respectively. The 24AB and 56BB cows showed calves with LSM± SE of 149.50± 4.17kg and 148.44± 2.73kg respectively, for weaning weight. No difference (P>0.05) was found and the heavy and light groups were similar for the allelic frequencies for this gene. The dam’s genotype did not affect the weaning weight of the calves. This suggests of having other factors, genetic or non-genetic, with major magnitude that affect the weaning weight.

Informações sobre peso à desmama de bezerros Nelore foram utilizadas após ajuste para idade padrão aos 205 dias, sexo, idade da mãe, touro e mês de desmama, para separar as reprodutrizes em dois grupos, segundo o peso de suas crias. As médias de peso dos bezerros ajustadas pelo método dos quadrados mínimos e erros-padrão (LSM± SE) foram para os grupos pesados (P) e leves (L) 163,21± 2,18kg e 134,44± 2,18kg, respectivamente, com 41 animais em cada grupo. Essas reprodutrizes foram submetidas a coleta de sangue para estudo de polimorfismos do gene da beta-lactoglobulina, por meio da técnica de PCR-RFLP. A amplificação e a digestão de um fragmento do gene da beta-lactoglobulina entre o éxon II e III identificou os genótipos 1AA, 24AB e 56BB, com as freqüências de 0,16 e 0,84 para os alelos A e B, respectivamente. Os 24 animais com genótipo AB apresentaram LSM± SE de peso de seus produtos de 149,50± 4,17kg, e os 56 animais de genótipo BB tiveram média de 148,44± 2,73kg. O teste do qui-quadrado não apresentou significância (P>0,05), isto é, os grupos P e L não diferiram entre si quanto às freqüências alélicas apresentadas para esse gene. O genótipo das reprodutrizes não afetou o peso à desmama de suas crias, o que sugere haver outros fatores genéticos e não genéticos de maior magnitude que afetam o peso à desmama.

Análise de polimorfismo do gene da somatotropina em vacas Nelore e seu efeito sobre o peso à desmama de suas progênies / Polimorphism analisys of somatotropin gene on Nelore cows and effect on weaning weight of the calf

Informaçöes sobre peso à desmama de um rebanho Nelore foram utilizadas após ajuste para idade padräo de 205 dias, sexo da cria, idade da mäe, touro e mês de desmama, para separar as reprodutrizes em dois grupos, cujos filhos diferiam nesse peso. As médias ajustadas pelo método dos quadrados mínimos foram para os grupos pesado (P) e leve (L) de 163,21ñ2,18kg e 134,44ñ2,18kg, respectivamente, com 41 animais em cada grupo. Essas reprodutrizes foram submetidas à coleta de sangue para estudo de polimorfismos do gene da somatotropina bovina, pela técnica de PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism). A amplificaçäo de uma regiäo entre o éxon III e V do gene da somatotropina permitiu analisar dois sítios de restriçäo. Para o sítio do éxon V, todos os animais foram identificados como monomórficos (Leu-Leu). Quanto ao sítio de íntron 3, foi possível identificar os seguintes genótipos 21 (+/-) e 60 (-/-), com as freqüências de 0,13 e 0,87 para os alelos (+) e (-), respectivamente. O peso dos filhos dos animais com o genótipo +/- foi de 152,42ñ4,41kg e os -/- 147,60 mais ou menos 2,61kg. Os grupos P e L näo diferiram entre si quanto à freqüências alélicas apresentadas. O genótipo das reprodutrizes näo afetou o peso à desmama de suas crias, existindo portanto outros efeitos genéticos e näo genéticos de maior magnitude

Análise de polimorfismo do gene da somatotropina em vacas Nelore e seu efeito sobre o peso à desmama de suas progênies

Data from a Nelore herd were used after adjustment of the weaning weight for 205 days of age, sex, age of dam, sire and weaning month and resulted into two groups of cows according to the in weaning weight of their calves (heavy and light groups). The least square means (LSM) for weaning weights were 163.21± 2,18kg and 134,44± 2.18kg, for heavy (H) and light (L) groups, with 41 animals each one. These animals were genotyped for DNA polymorphisms of the bovine somatotropin gene, using PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism). Amplification of a region between exons III and V of somatotropin gene allowed analysis of two restriction sites. All animals showed monomorphism for the V exon site, showing the (Leu-Leu) genotype. At intron 3 site, there were identified the 21+/- and 60 -/- genotypes, with 0.13 and 0.87 frequencies to (+) and (-) alleles, respectively. The calves from +/- counts was of 152.42± 4.41kg and of calves from -/- cows was 147.60± 2.61kg. Heavy and light groups were similar for the allelic frequencies. The dam’s genotype did not affect the weaning weight of the calves. This suggests the existence of another genetic or non-genetic factors with major magnitude.

Informações sobre peso à desmama de um rebanho Nelore foram utilizadas após ajuste para idade padrão de 205 dias, sexo da cria, idade da mãe, touro e mês de desmama, para separar as reprodutrizes em dois grupos, cujos filhos diferiam nesse peso. As médias ajustadas pelo método dos quadrados mínimos foram para os grupos pesado (P) e leve (L) de 163,21± 2,18kg e 134,44± 2,18kg, respectivamente, com 41 animais em cada grupo. Essas reprodutrizes foram submetidas à coleta de sangue para estudo de polimorfismos do gene da somatotropina bovina, pela técnica de PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism). A amplificação de uma região entre o éxon III e V do gene da somatotropina permitiu analisar dois sítios de restrição. Para o sítio do éxon V, todos os animais foram identificados como monomórficos (Leu-Leu). Quanto ao sítio do íntron 3, foi possível identificar os seguintes genótipos 21 (+/-) e 60 (-/-), com as freqüências de 0,13 e 0,87 para os alelos (+) e (-), respectivamente. O peso dos filhos dos animais com o genótipo +/- foi de 152,42± 4,41kg e os -/- 147,60± 2,61kg. Os grupos P e L não diferiram entre si quanto às freqüências alélicas apresentadas. O genótipo das reprodutrizes não afetou o peso à desmama de suas crias, existindo portanto outros efeitos genéticos e não genéticos de maior magnitude.

Análise de polimorfismos do gene da k-caseína em fêmeas da raça Nelore e efeito sobre o peso à desmama de suas progênies / Polimorphism analysis of k-casein gene on Nelore females and effect on weaning weight of the calves

Informaçöes sobre peso à desmama de um rebanho Nelore, após ajuste para idade padräo de 205 dias, sexo da cria, idade da mäe, touro e mês de desmama, foram utilizadas para separar as reprodutrizes em dois grupos, cujos produtos diferiam em peso. As médias ajustadas pelo método dos quadrados mínimos e erros-padräo para os grupos pesado (P) e leve (L) foram 163,21ñ2,18kg e 134,44ñ2,18kg, respectivamente, com 41 animais em cada grupo. Colheram-se amostras de sangue das reprodutrizes para o estudo de polimorfismos do gene da k-caseína, pela técnica de polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. A análise de um segmento do éxon IV do gene da k-caseína identificou os genótipos 71AA, 10AB e 1BB, com as freqüências de 0,92 e 0,08 para os alelos A e B, respectivamente. Os pesos à desmama dos produtos dos genótipos AA e AB foram, respectivamente, 147,73ñ2,38kg e 156,76ñ6,35kg. Os grupos P e L näo diferiram entre si quanto às freqüências alélicas apresentadas para esse gene. O genótipo das reprodutrizes näo afetou o peso à desmama de suas crias, existindo, portanto, outros efeitos genéticos e näo genéticos de maior magnitude

Análise de polimorfismos do gene da kapa-caseína em fêmeas da raça Nelore e efeito sobre o peso à desmama de suas progênies

Data from a Nelore herd were used after adjustment of the weaning weight for 205 days of age, sex, age of dam, sire and month of weaning resulting two groups of cows that differed in weaning weight of their calves. The least square means (LSM) and standard error (SE) were 163.21±2.18kg and 134.44±2.18kg, for heavy (H) and light (L) groups, with 41 animals each one. These animals were genotyped for DNA polymorphisms of kappa-casein gene, using PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism). The segment analysis of kappa-casein IV exon identified the genotypes 71AA, 10AB and 1BB, with frequencies of 0.92 and 0.08 for A and B alleles, respectively. The LSM±SE for weaning weight were 147.73±2.38kg and 156.76± 6.35kg for calves of AA and AB genotype cows. Heavy and light groups were similar for the allelic frequencies for this gene. The dam’s genotype did not affect the weaning weight of the calves. This suggests the existence of another genetic or non-genetic factors with major magnitude.

Informações sobre peso à desmama de um rebanho Nelore, após ajuste para idade padrão de 205 dias, sexo da cria, idade da mãe, touro e mês de desmama, foram utilizadas para separar as reprodutrizes em dois grupos, cujos produtos diferiam em peso. As médias ajustadas pelo método dos quadrados mínimos e erros-padrão para os grupos pesado (P) e leve (L) foram 163,21±2,18kg e 134,44±2,18kg, respectivamente, com 41 animais em cada grupo. Colheram-se amostras de sangue das reprodutrizes para o estudo de polimorfismos do gene da kapa-caseína, pela técnica de polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. A análise de um segmento do éxon IV do gene da kapa-caseína identificou os genótipos 71AA, 10AB e 1BB, com as freqüências de 0,92 e 0,08 para os alelos A e B, respectivamente. Os pesos à desmama dos produtos dos genótipos AA e AB foram, respectivamente, 147,73±2,38kg e 156,76±6,35kg. Os grupos P e L não diferiram entre si quanto às freqüências alélicas apresentadas para esse gene. O genótipo das reprodutrizes não afetou o peso à desmama de suas crias, existindo, portanto, outros efeitos genéticos e não genéticos de maior magnitude.

Fatores que afetam a amplificaçäo de DNA pela técnica de RAPD (random amplified polymorphic DNA) / Factors affecting DNA amplification by RAPD (rondom amplified polymorphic DNA

Alguns reagentes que afetam as amplificaçöes (MgCl2 subscrito, dNTPs, "primers", DNA) foram testados para se obter melhor resoluçäo e reprodutibilidade das impressöes digitais de DNA em bovinos. As concentraçöes dos "primers" de 0,1mM foi considerada suficiente para uma amplificaçäo satisfatória. As concentraçöes de DNA genômico de 2,5ng/ml e de dNTPs na faixa de 0,1mM foram as que obtiveram resultados mais fortes e reprodutível. Um dos fatores que demonstraram maior variaçäo no padräo de amplificaçäo foi o MgCl2 subscrito. Concentraçäo de 2,0mM demonstrou ser suficiente para uma forte amplificaçäo. Foi possível demonstrar variaçöes nos padröes de amplificaçäo obtidos e associá-los com os fatores acima citados. A padronizaçäo entre diferentes laboratórios e a reprodutibilidade dos RAPDs deve levar em consideraçäo tais fontes de variaçäo para que se faça possível o intercâmbio de informaçäo entre laboratórios e a montagem de bancos de dados seguros obtidos por RAPD

Identificaçäo dos alelos A e B da ß-lactoglobulina em populaçöes de bovinos da raça Gir / Identification of A and B variants of the ß-lactoglobulin gene in Brazilian Gir populations

Populaçöes de bovinos da raça Gir foram genotipadas para a proteína do leite ß-lactoglobulina. O estudo foi realizado com uma populaçäo de fêmeas Gir selecionadas para produçäo leiteira, outra de fêmeas näo selecionadas, e uma amostra de touros Gir de Centrais de Inseminaçäo Artificial (CIA). Os alelos A e B da ß-lactoglobulina foram identificados através de PCR-RFLP com a enzima de restriçäo HphI. As freqüências encontradas foram 0,4487 para A e 0,5513 para B em fêmeas Gir näo selecionadas. Para as fêmeas Gir selecionadas, a freqüência foi de 0,35 e 0,65, respectivamente para A e B; para os touros Gir de CIA, 0,404 e 0,596. Os resultados foram analisados pela Lei do Equilíbrio de Hady-Weinberg e a tabela de dispersäo de freqüência pelos método de X elevado ao quadrado com nível de significância estabelecido em 10 por cento. A populaçäo de fêmeas selecionadas se mostrou em desequilíbrio em genotípico, enquanto as outras se mostraram em equilíbrio. Comparando-se as populaçöes, as freqüência gênicas e genotípicas foram estatisticamente iguais para todas as comparaçöes

Análise genotípica do exon IV do gene da k-caseína de bubalinos (Bubalus bubalis) / Genotypic analysis of the exon IV of the buffaloes k-casein gene (Bubalus bubalis)

Amostras de sangue de duas raças de Bubalus bubalis, Murrah (n=30) e Mediterrâneo (n=14), e mestiços (Murrah/Mediterrâneo n=52), foram genotipadas quanto ao locus da k-caseína. As variantes A e B foram identificadas por meio da análise dos polimorfismos de comprimento de fragmentos de restriçäo (RFLPs) utilizando-se as enzimas Taq I e Hind III, após amplificaçäo de 99 pares de bases do exon IV pela reaçäo em cadeia da polimerase (PCR), com "primers" específicos para este gene de bovinos. Em relaçäo à Taq I, os fragmentos de DNA de bubalinos apresentaram tamanhos correspondentes ao de bovinos, sendo que as freqüências dos alelos A e B foram, respectivamente, 1,0 e 0 em Murrah e Mediterâneo e 0,99 e 0,01 em mestiços. O uso de Hind III revelou polimorfismo no gene de bubalino, diferente daquele encontrado em bovinos, apresentando os alelos C e D as freqüências de 0,45 e 0,55 em Murrah, 0,21 e 0,79 em Mediterrâneo e 0,28 e 0,72 em mestiço